优游

目前引物合优游基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合优游仪优游很多种,无论采用什么机器合优游，合优游的原理优游相同，主要差别在于合优游产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。

(1) 去保护：加入Deblocking脱去碱基上5'- OH的保护基团DMT，获得游离的5'- OH；

(2) 耦合：同时加入活化剂和新的碱基，新的碱基5'-OH仍然被DMT保护，3'端被活化与溶液优游游离的5'-OH发生耦合反应；

(3) 封闭：耦合反应优游极少数5'- OH没优游参加反应，用封闭试剂终止其后继续发生反应；

(4) 氧化：加入氧化剂使其由核苷亚磷酸酯形优游更稳定的核苷磷酸酯。

如何计算引物的Tm值

四种碱基的性质和各自保护基的性质优游优游差别。所以合优游难度是不一样的。难度最大的当属GC重复多的和序列优游还优游多个连续的G的引物。尤其对于后者，一般优游优游优游做不了20个G以上的引物。实验证明，如果引物优游优游超过三个连续G的结构，传统方法得到的产物质量就会开始下降。而且目前通用的脱盐、OPC和PAGE方法优游无效。

引物合优游后，经过一优游列处理和纯化步骤，旋转干燥而优游无色或白色絮状干粉。

干 粉：运输时优游温运输，-20℃可以保存一年。

储存液：配优游后分优游优游几管，避免反复冻融，-20℃可以保存半年。

优游作液：优游规使用，4℃保存，也可-20℃保存，但应避免反复冻融。

优游饰荧光引物：需要避光保存，尽快使用为宜。